Noticias

May 18, 2023

Los polisacáridos de Pseudostellaria heterophylla modulan la microbiota intestinal y alivian el síndrome de deficiencia del bazo en ratas

Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 20217 (2022) Cita este artículo 1391 Accesos 1 Citas Detalles de métricas Pseudostellaria heterophylla, también llamada Tai-zi-shen (TZS) en tradicional

Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 20217 (2022) Citar este artículo

1391 Accesos

1 Citas

Detalles de métricas

Pseudostellaria heterophylla, también llamada Tai-zi-shen (TZS) en la Medicina Tradicional China (MTC), siempre se usa clínicamente para tratar los síntomas de deficiencia del bazo. Los polisacáridos en TZS tienen diversas actividades farmacológicas, que incluyen antidiabético, regulación inmune y protección del miocardio. Sin embargo, la relación entre los efectos estimulantes del bazo de la TZS o sus polisacáridos y la flora intestinal no está clara. Este estudio investigó los efectos de la decocción de TZS (PHD) y polisacárido (PHP) sobre la función inmune y la flora intestinal en un modelo de rata con síndrome de deficiencia del bazo (SDS) inducido por una decocción de ruibarbo crudo (RRD). PHD y PHP aumentaron el índice de órganos inmunitarios, aliviaron la filtración de células inflamatorias y redujeron los niveles de citocinas proinflamatorias en ratas con síndrome de deficiencia del bazo. Además, se promovió la producción de ácido butírico en los grupos PHD y PHP. Además, la secuenciación del gen 16S rRNA mostró que PHD y PHP redujeron la abundancia relativa de Firmicutes mientras aumentaban la de Bacteroidetes; aumentó significativamente la abundancia de Lactobacillus y disminuyó la abundancia de Rombutsia; y PHP aumentó significativamente la abundancia de Alloprevotella. Y hubo una correlación positiva significativa entre el alivio del SDS y las bacterias productoras de ácidos grasos de cadena corta (AGCC). Estos hallazgos sugirieron que PHD y PHP, especialmente PHP, tienen el potencial de aliviar la deficiencia del bazo al reducir la inflamación intestinal, modular la estructura y composición de la microbiota intestinal y promover la producción de ácido butírico.

En la Medicina Tradicional China (MTC), “bazo” no se refiere al órgano anatómico del bazo, sino que controla la digestión, la absorción, la transición y el metabolismo de las sustancias dietéticas1,2. El síndrome de deficiencia de bazo (SDS) es un síndrome común en la MTC, causado por trastornos alimentarios, malestar por temperatura y exceso de trabajo. Sus manifestaciones clínicas incluyen diarrea, pérdida de peso, fatiga y escalofríos1,2,3,4. En la investigación moderna, el SDS siempre está estrechamente relacionado con enfermedades del sistema digestivo, trastornos hormonales gastrointestinales, inmunodeficiencia y trastornos del metabolismo energético2,4,5,6,7. La relación entre la microbiota intestinal y el SDS ha sido demostrada mediante experimentos con animales y estudios clínicos1,8,9,10,11. En China, el SDS suele tratarse con medicinas tradicionales chinas que fortalecen el bazo y reponen el Qi (espíritu)11,12,13.

Pseudostellaria heterophylla, también llamada Tai-zi-shen (TZS) en chino, es el tubérculo de raíz seca de P. heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffim. La TZS se registró por primera vez en Běn Cǎo Cóng Xīn (en 1757) y se ha utilizado ampliamente como medicina y alimento14. Como se describe en la Farmacopea de la República Popular China, se ha descubierto que TZS vigoriza el bazo y nutre el Qi, promueve la producción de líquidos e hidrata los pulmones15. La TZS siempre se utiliza en la medicina tradicional china para tratar los síntomas de deficiencia del bazo, como diarrea, pérdida de apetito y dificultad para respirar16,17. Se ha demostrado que TZS y sus extractos reducen la incidencia de la deficiencia del bazo en ratones, mejoran la condición física de los ratones con deficiencia del bazo y mejoran significativamente los índices de los órganos inmunológicos del ratón, como el bazo y el timo, nutriendo así el Qi y fortaleciendo. el bazo16,17,18. Los principales constituyentes de TZS incluyen polisacáridos, péptidos cíclicos, aminoácidos, saponinas y otros componentes químicos, siendo los polisacáridos los principales responsables de la bioactividad de TZS19. Los polisacáridos de TZS tienen diversas actividades farmacológicas, incluidas actividades antidiabéticas, reguladoras inmunitarias y protectoras del miocardio14,19,20,21. Sin embargo, se sabe poco sobre la relación entre los efectos estimulantes del bazo de la TZS y sus polisacáridos y la flora intestinal.

El presente estudio investigó los efectos de la decocción de Pseudostellaria heterophylla (PHD) y del polisacárido de Pseudostellaria heterophylla (PHP) en un modelo de rata de SDS inducida por una decocción de ruibarbo crudo administrada por sonda. Se evaluaron los efectos de los TZS sobre el índice de órganos inmunitarios, las citocinas proinflamatorias, los ácidos grasos de cadena corta (AGCC) y la estructura y composición de la flora intestinal. El propósito de este estudio fue explorar si la capacidad de TZS para mejorar el síndrome de deficiencia del bazo estaba relacionada con los efectos de los polisacáridos sobre la flora intestinal.

El contenido de azúcar total del polisacárido crudo fue del 67,18% según la curva estándar de glucosa. La composición de monosacáridos del polisacárido crudo se analizó basándose en los picos cromatográficos de la sustancia de referencia y las muestras de glucosa y galactosa. Los resultados mostraron que el polisacárido estaba compuesto principalmente de glucosa y galactosa, cuyo contenido porcentual era de aproximadamente 44,25% y 14,43% (Fig. S1). Además, también se detectaron ácido glucurónico, ácido galacturónico, arabinosa, manosa, xilosa y xilosa ramnosa en el polisacárido bruto.

Las ratas se dividieron en cuatro grupos; tres grupos fueron tratados durante 7 días con RRD para inducir SDS y el cuarto grupo, Control (Ctrl), fue tratado con solución salina sola (Fig. 1). Las ratas tratadas con RRD se trataron posteriormente entre los días 8 y 14 con PHD, PHP o solución salina (grupo modelo), como se ilustra en la Tabla 1. Y se midieron sus pesos corporales durante 14 días (Fig. 2A). La tasa de aumento de peso durante los días 1 a 7 fue mayor en el grupo Ctrl que en los otros tres grupos. Las ratas de los grupos PHD, PHP y Model mostraron síntomas de diarrea, junto con pelo opaco y espalda arqueada, lo que sugiere que estas ratas tenían SDS. La tasa de aumento de peso durante los días 8 a 14 fue significativamente mayor en las ratas tratadas con PHD y PHP que en el grupo Modelo, lo que indica que PHD y PHP podrían aumentar el peso corporal en este modelo de rata. Además, el contenido de humedad fecal del grupo Modelo fue significativamente mayor que el del Ctrl (p < 0,05). Y en comparación con el grupo Modelo, PHD y PHP redujeron significativamente el contenido de humedad fecal (p <0,05), como se muestra en la Fig. 2B.

El esquema del plan experimental y el procedimiento de tratamiento.

Efecto de PHD y PHP sobre el peso corporal de ratas (A) y el contenido de humedad fecal (B). Los valores se presentaron como media ± DE (n = 5). Las diferencias significativas (p <0,05) se determinaron mediante ANOVA unidireccional y la prueba de Kruskal-Wallis de muestras independientes utilizando el software SPSS (versión 33.0). Las diferentes letras minúsculas (a y b) fueron significativamente diferentes al nivel de p <0,05.

La gastrina (GAS) es una hormona importante para evaluar la función fisiológica del tracto gastrointestinal. Como se muestra en la Tabla 2, el nivel de GAS en el grupo Modelo disminuyó significativamente en comparación con el grupo Ctrl (p <0,05). El tratamiento con PHD y PHP resultó en niveles significativamente más altos de GAS en comparación con el grupo Modelo (p <0,05). El nivel de amilasa sérica (AMS) es otro parámetro para evaluar la deficiencia del bazo. Las comparaciones mostraron que la concentración de AMS se redujo significativamente en el grupo Modelo en comparación con el grupo Ctrl (p <0,05). Después de la medicación con PHP, el nivel de AMS fue significativamente mayor que en el grupo Modelo (p <0,05). Sin embargo, no hubo diferencias significativas entre el Modelo y el PHD.

El bazo y el timo son los principales órganos inmunitarios de los mamíferos y su peso está relacionado con las funciones del sistema inmunológico. Las comparaciones mostraron que los índices de bazo y timo fueron significativamente más bajos en el grupo Modelo que en el grupo Ctrl (p <0,05 cada uno; Tabla 3). Sin embargo, el tratamiento con PHD o PHP resultó en índices de bazo y timo significativamente más altos que los del grupo Modelo (p <0,05 cada uno).

Los cambios histopatológicos de los dos puntos en cuatro grupos se analizaron mediante secciones teñidas con HE. Como se muestra en la Fig. 3, se observó un gran grado de infiltración de células inflamatorias en el colon de ratas del grupo Modelo. En el grupo PHD y PHP, el grado de infiltración de células inflamatorias se redujo significativamente.

Imágenes representativas de las secciones teñidas con HE (aumento de 200 ×) de los dos puntos en cuatro grupos. Los valores se presentaron como media ± DE (n = 5). Las diferencias significativas (p <0,05) se determinaron mediante ANOVA unidireccional y la prueba de Kruskal-Wallis de muestras independientes utilizando el software SPSS (versión 33.0).

La función del sistema inmunológico también se ha asociado con el nivel de citoquinas proinflamatorias, como IL-1β, IL-6 y TNF-α. Las concentraciones séricas de IL-6 y TNF-α, determinadas por ELISA, fueron significativamente mayores en el grupo Modelo que en el grupo Ctrl (p <0,05; Tabla 4). La administración intragástrica de PHD y PHP redujo significativamente los niveles de IL-6 y TNF-α (p < 0,05). En cuanto a la IL-1β, no hubo diferencias significativas entre los cuatro grupos en las concentraciones de IL-1β.

Los SCFA, que se producen principalmente a través de la digestión de polisacáridos no almidonados por la microbiota intestinal, desempeñan funciones fundamentales en el mantenimiento del equilibrio entre el intestino y el sistema inmunológico del huésped22,23. El ácido acético, el ácido propiónico y el ácido butírico fueron los AGCC más abundantes en el ciego de estas ratas, y la concentración de ácido butírico en el grupo Modelo fue significativamente menor que la del grupo Ctrl (p <0,05; Tabla 5). Aunque los niveles de ácido acético y ácido propiónico también se redujeron hasta cierto punto, no hubo una diferencia significativa. El tratamiento con PHD y PHP aumentó significativamente el nivel de ácido butírico en comparación con el grupo Modelo (p <0,05 cada uno), lo que indica que estos agentes podrían facilitar la capacidad de la flora intestinal para producir más ácidos butíricos.

Los efectos de PHD y PHP en la microbiota intestinal se evaluaron mediante análisis de secuenciación del gen 16S rRNA. Se obtuvo un total de 1.266.939 etiquetas efectivas mediante empalme, control de calidad y filtrado de quimeras, incluidas 302.596 etiquetas en el grupo Ctrl, 324.644 en el grupo Modelo, 316.659 en el grupo PHD y 323.040 en el grupo PHP (Tabla S1). Con un 97% de acuerdo, las unidades taxonómicas operativas (OTU) se agruparon según los datos válidos de cada muestra. Los grupos Ctrl, Model, PHD y PHP produjeron totales de 684 ± 56, 616 ± 22, 581 ± 19 y 652 ± 48 OTU, respectivamente, con un diagrama de Venn que muestra que los cuatro grupos compartieron 660 OTU (Fig. 4A–B).

Diagrama de Venn de especies comunes o endémicas entre cuatro grupos: grupo Ctrl, grupo Modelo, grupo PHD y grupo PHP (A); histograma de OTU en los cuatro grupos anteriores (B). Los valores se presentaron como media ± DE (n = 5).

La diversidad, la riqueza y las diferencias estructurales de las comunidades microbianas se evalúan con frecuencia mediante análisis de diversidad, incluida la diversidad α y β. La α-Diversidad fue determinada por los índices de Simpson, Shannon, Chao1 y ACE, con la diversidad de la comunidad determinada por los índices de Simpson y Shannon y la riqueza de la comunidad por los índices Chao1 y ACE. Los cuatro índices fueron significativamente más bajos en el Modelo que en el grupo Ctrl (p <0,05 cada uno; Fig. 5A-D), lo que indica que el tratamiento RRD redujo la diversidad y riqueza de la comunidad. Los índices de Simpson y Shannon fueron más altos en los grupos PHD y PHP que en el grupo Modelo (p <0,05), lo que sugiere que PHD y PHP mejoraron la diversidad de la microbiota intestinal. Los índices Chao1 y ACE en el grupo PHP también fueron más altos que los del grupo Modelo, lo que indica que el tratamiento con PHP aumentó la riqueza de la microbiota intestinal (p <0,05). Por el contrario, los dos índices en el grupo de PHD no difirieron significativamente de los del grupo Modelo, lo que muestra que la intervención de PHD no tuvo ningún efecto aparente sobre la riqueza de la microbiota intestinal.

Efecto de PHD y PHP sobre el índice de diversidad α (Simpson, Shannon, ACE y Chao1) de la microbiota intestinal (A – D). Los valores se presentaron como media ± DE (n = 5). Las diferencias significativas (p <0,05) se determinaron mediante ANOVA unidireccional y la prueba de Kruskal-Wallis de muestras independientes utilizando el software SPSS (versión 33.0). Las diferentes letras minúsculas (a, b y c) fueron significativamente diferentes al nivel de p <0,05.

La diversidad β se determinó mediante PCoA, con un árbol de grupos que evalúa los efectos de PHD y PHP en la estructura de la microbiota intestinal. Se realizó UniFrac PCoA ponderada de abundancia de OTU para comparar las similitudes comunitarias entre los cuatro grupos. El análisis de ANOSIM indicó diferencias significativas en la estructura comunitaria entre grupos, que fueron mayores que dentro del grupo (Fig. S2). La primera coordenada principal (PC1), que representó el 39,78% de la diversidad, fue la más importante para distinguir el grupo Modelo del grupo Ctrl (Fig. 6A). Tanto el grupo PHD como el PHP se distinguieron claramente del grupo Modelo según la segunda coordenada principal (PC2). Las diferencias entre muestras se determinaron mediante un árbol filogenético resultante de la agrupación jerárquica de distancias UniFrac ponderadas. Los grupos Ctrl y Modelo se ubicaron en dos ramas del árbol de clústeres, con la mayoría de los grupos PHP de muestra separados del grupo Modelo (Fig. 6B). Las diferencias grupales en diversidad β basadas en Unifrac ponderado se analizaron mediante la prueba de Tuckey (Fig. S3) y los resultados mostraron diferencias significativas entre el grupo Ctrl y el grupo Modelo (p <0,05), y entre el grupo Modelo y el grupo PHP (p <0,01). . Sin embargo, no hubo diferencias significativas entre el grupo Modelo y el grupo PHD. En conjunto, estos hallazgos indicaron que el tratamiento con PHP podría aliviar la alteración de la estructura comunitaria inducida por la RRD.

Efecto de PHD y PHP sobre la diversidad β, que se evaluó mediante análisis PCoA basado en las distancias UniFrac no ponderadas (A) y UPGMA basado en la distancia UniFrac ponderada (B). Cada parcela representó una muestra, n = 5.

Se detectaron diez filos de composiciones de microbiota intestinal a nivel de filo en los cuatro grupos, siendo Firmicutes, Bacteroidetes, Actinobacteriota y Desulfobacterota los filos dominantes. Las distribuciones de estos filos diferían entre los cuatro grupos (Tabla S2). Por ejemplo, la abundancia relativa de Firmicutes fue mayor y la abundancia relativa de Bacteroidetes menor en el grupo Modelo que en el grupo Ctrl (p <0,05 cada uno; Fig. 7A). El tratamiento con PHD y PHP disminuyó significativamente la abundancia de Firmicutes pero aumentó la abundancia de Bacteroidetes en comparación con el grupo Modelo (p <0,05 cada uno). Y el valor de la relación Firmicutes/Bacteroidetes (F/B) fue significativamente mayor en el grupo Modelo que en el grupo Ctrl, pero se revirtió en los grupos PHD y PHP, especialmente en este último.

Efecto de PHD y PHP sobre la composición y abundancia relativa de la microbiota intestinal en ratas con diarrea inducida por deficiencia del bazo. (A) Abundancia relativa de microbiota intestinal a nivel de filo; (B) Abundancia relativa de microbiota intestinal a nivel de género; (C) Mapa de calor de grupos de abundancia relativa de especies a nivel de género.

A nivel de género, los taxones predominantes fueron Romboutsia, Lactobacillus, Lachnospiraceae_NK4A136_group, Alloprevotella, UCG-005, Monoglobus, Dubosiella, Blautia, Christensenellaceae_R-7_group y Turicibacter (Fig. 7B, C). La abundancia relativa de Romboutsia fue significativamente mayor, mientras que la abundancia relativa de Lactobacillus no hubo cambios significativos, y la de Lachonospiraceae_NK4A136_group y Alloprevotella fueron significativamente menores en el grupo Modelo que en el grupo Ctrl (Tabla S3). El tratamiento con PHD y PHP redujo significativamente la abundancia relativa de Romboutsia (p < 0,05), mientras que aumentó significativamente los niveles de Lactobacillus (p < 0,05). Además, la abundancia relativa de Alloprevotella en el grupo PHP fue significativamente mayor que en el grupo Modelo (p <0,05).

Los biomarcadores que diferían significativamente entre estos grupos de ratas se determinaron mediante el tamaño del efecto del análisis discriminante lineal (LDA) (LEfSe). Un histograma de puntuación LDA mostró que, en comparación con el grupo Ctrl, el grupo Modelo se caracterizaba por cantidades mayores de Romboutsia, Turicibacter y Clostridium_sensu_stricto_1 y cantidades menores de Lachnospiraceae_NK4A136_group, Monoglobus, Alloprevotella, Desulfovibrio y Ruminococcus, lo que sugiere que la flora intestinal había sido alterado significativamente (Fig. 8). Los niveles de Alloprevotella y Fusicatenibacter fueron más altos en los grupos PHD y PHP que en el grupo Modelo, siendo especialmente alta la abundancia del probiótico Lactobacillus. Además, los niveles de otros taxones, como Dialister, Quinella, Eubacterium_siraeum_group y Fusicatenibacter, fueron notablemente más altos en el PHP que en el grupo Modelo. En conjunto, estos resultados indican que el tratamiento con PHD y PHP podría modular comunidades específicas de microbiota intestinal.

Histograma de puntuación LDA de cuatro grupos (solo se enumeraron taxones con puntuación LDA superior a 3).

En la práctica clínica, la TZS se utiliza principalmente para tratar afecciones como el síndrome de deficiencia del bazo, fatiga, debilidad, sudoración y sed espontáneas y deficiencia pulmonar con tos y otros síntomas16,17,24. Aunque se ha demostrado que el TZS y sus polisacáridos alivian los síntomas de la deficiencia del bazo, pocos estudios han evaluado las relaciones entre los efectos de fortalecimiento del bazo del TZS y la flora intestinal. En este estudio, el tratamiento con PHD y PHP aumentó los niveles de AMS y GAS y el índice de órganos inmunitarios, pero disminuyó los niveles de IL-6 y TNF-α. Mientras tanto, el tratamiento con PHP restauró la estructura y composición de la microbiota intestinal y promovió la producción de ácido butírico.

La deficiencia del bazo se manifiesta principalmente por una función digestiva debilitada, una secreción anormal de hormonas gastrointestinales y una disminución de la absorción en el intestino delgado25. Estudios anteriores demostraron que la función digestiva debilitada en el SDS se veía afectada por una secreción insuficiente de AMS26 y una actividad reducida de Na+-K+-ATPasa27. Además, el SDS también está estrechamente relacionado con la secreción de hormonas gastrointestinales28. La gastrina liberada por las células G del seno gástrico y del duodeno estimula la secreción de ácido gástrico, pepsina y bilis y mejora la motilidad gastrointestinal29. En este estudio, se observaron niveles más altos de AMS y GAS en los grupos PHD y PHP en comparación con el grupo Modelo, lo que indicó que PHD y PHP mejoraron la función digestiva gastrointestinal.

La deficiencia del bazo suele ir acompañada de una deficiencia inmunitaria, que generalmente se manifiesta como una disminución del índice de órganos inmunitarios, niveles elevados de citocinas proinflamatorias y deterioro de la barrera intestinal5,11,30. También se ha encontrado en el presente estudio que disminuye el índice de órganos inmunitarios (bazo y timo), aumenta los niveles de citoquinas proinflamatorias IL-6 y TNF-α y la importante infiltración de células inflamatorias en el colon en el grupo modelo. El timo y el bazo, dos órganos importantes para la diferenciación y maduración de las células inmunitarias, están estrechamente relacionados con la función inmunitaria31,32. Los pesos relativos del timo y del bazo se consideran indicadores de inmunidad no específica33. Además, el TNF-α es una citocina multifuncional secretada por macrófagos que no sólo afecta la respuesta inflamatoria sistémica sino que también regula la expresión de otras citocinas inflamatorias. La IL-6 suele liberarse en las primeras etapas de la inflamación e induce una respuesta inflamatoria30,34. Después de la intervención con PHD y PHP, las ratas con SDS mostraron un aumento significativo en el índice de órganos inmunes y una disminución en los niveles de IL-6 y TNF-α, lo que sugiere que PHD y PHP mejoraron la función inmune de las ratas SDS. Investigaciones anteriores de nuestro grupo encontraron que un polisacárido purificado de PHP (PF40) podría mejorar la inmunidad mediada por células al mejorar la fagocitosis de los macrófagos, la proliferación de esplenocitos, la actividad de las células NK y la respuesta de hipersensibilidad de tipo retardado35. Este podría ser el mecanismo para que PHD y PHP mejoren la función inmune.

También se ha informado que el SDS está estrechamente relacionado con alteraciones microbianas intestinales, lo que se refiere a cambios significativos en la estructura y composición de la flora intestinal1,10,11,28,36. Se ha informado que los polisacáridos sin almidón extraídos de Codonopsis Radix, Radix Aconiti Lateralis Preparata y el compuesto Sijunzi podrían regular la estructura y composición de la flora intestinal y promover la reproducción de los probióticos intestinales3,5,37. En el presente estudio, PHP no solo tiene un efecto positivo en la diversidad y abundancia de los probióticos, sino que también hace que la estructura y composición de los microorganismos intestinales se acerquen a los del grupo Ctrl. Después del tratamiento con PHD y PHP, la ración de Firmicutes (F) / Bacteroidetes (B) disminuyó, observándose una mayor disminución en el grupo de PHP. La ración A/B es considerada un indicador importante de la salud intestinal, correlacionándose positivamente con el desorden de la flora intestinal en diversas enfermedades, como colitis, diarrea tipo quimioterapia y obesidad38,39. Además, la abundancia de Rombutsia se redujo significativamente, mientras que la de Lactobacillus aumentó significativamente en comparación con el grupo Modelo. Se informó que la rombutsia (perteneciente a Firmicutes) se asocia con el metabolismo de las proteínas en el intestino40. Lactobacillus es un probiótico común que inhibe la producción de citoquinas proinflamatorias y mejora la disfunción intestinal41,42,43. Varios estudios demostraron que la abundancia de Lactobacillus se redujo en la flora intestinal de ratas SDS28,44. Y el tratamiento con PHP también aumentó notablemente la abundancia de Alloprevotella. Estos resultados implicaron que PHD y PHP podrían modular la flora intestinal en ratas SDS.

La estructura y función de las comunidades microbianas intestinales pueden contribuir a la variación interindividual en la respuesta de las citocinas a las estimulaciones microbianas45. Las respuestas inmunitarias aberrantes acompañadas de una producción anormal de citoquinas inflamatorias siempre están estrechamente relacionadas con el microbioma intestinal en gran parte al producir moléculas pequeñas, como AGCC, para mediar en las interacciones microbianas entre el huésped y los microbios46,47. Se ha demostrado que las alteraciones microbianas intestinales causadas por el SDS inhibían la producción de SCFA7,48. Según la correlación de Spearman, hubo una correlación positiva significativa entre el alivio del SDS y las bacterias productoras de SCFA (Fig. S4). Los SCFA son metabolitos de la flora intestinal y mejoran la función de la barrera epitelial, mejoran la permeabilidad intestinal e inhiben la inflamación2,11,30. Lachnospiraceae_NK4A136_group y Alloprevotella son los principales productores de butirato en el intestino humano, que es la fuente de energía preferida de las células epiteliales del colon y es importante para mantener la función de la barrera intestinal49,50. En una palabra, PHP indujo a la flora intestinal a producir más ácido butírico, lo que podría deprimir la producción de proinflamatorios para regular la homeostasis intestinal.

El presente estudio demostró que tanto PHD como PHP podrían aliviar el SDS causado por una decocción de ruibarbo crudo, principalmente al mejorar la función inmune, regular la flora intestinal y promover la producción de SCFA, siendo los efectos del PHP más significativos. La flora intestinal desempeña un papel importante en la capacidad de las TZS para aliviar el SDS, siendo los polisacáridos de las TZS la respuesta a estos efectos. Debido a que los polisacáridos utilizados en este experimento son polisacáridos crudos de TZS, no está claro si estos efectos dependen de los pesos moleculares y las estructuras químicas de los polisacáridos. El polisacárido purificado de TZS se utilizaría para demostrar el papel de la microbiota intestinal en la mejora del SDS con más modelos de SDS en el futuro.

Las raíces desecadas de ruibarbo crudo se sumergieron en agua en una proporción sólido:líquido de 1:10 (m/v) durante 30 minutos y se calentaron hasta una ligera ebullición durante 1 h. La mezcla se filtró con una gasa y se concentró hasta 1/10 del volumen original mediante evaporación a 80 °C. Esta decocción de ruibarbo crudo (1 g/ml) se almacenó a 4 °C para su uso posterior.

Pseudostellaria Heterophylla (TZS) se produjo en el condado de Zherong, provincia de Fujian, China. Las raíces secas de TZS se cortaron en pequeños trozos de 0,3 a 0,5 cm. Las piezas se sumergieron en agua en una proporción sólido:líquido de 1:5 (m/v) durante 0,5 h y se calentaron hasta una ligera ebullición durante 1 h. Se repitió el procedimiento y la mezcla se filtró con una gasa y se concentró hasta 2/5 del volumen original. Esta decocción de TZS (0,5 g/ml) se almacenó a 4 °C para su uso posterior.

Las raíces desecadas de TZS se trituraron, se pasaron a través de un tamiz de malla 20 y se sumergieron en éter de petróleo en una proporción sólido:líquido de 1:2 (m/v). La mezcla se extrajo dos veces a reflujo a 60 °C durante 2 h. El polvo magro se extrajo dos veces con agua en una proporción sólido:líquido de 1:10 (m/v) a reflujo a 100 °C durante 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y se centrifugó a 5000 rpm durante 15 minutos para eliminar los materiales sólidos. El sobrenadante se concentró hasta 1/4 del volumen original en un baño de agua termostático a 100 °C. El líquido concentrado se desproteinizó mediante el método Sevege con alcohol n-butílico y cloroformo, a una relación líquido:alcohol butílico:cloroformo de 25:5:1 (v/v/v). La mezcla se agitó durante 15 min y se centrifugó a 5000 rpm durante 5 min. El sobrenadante se mezcló con cuatro volúmenes de etanol absoluto y se incubó durante la noche. El precipitado de la capa inferior se disolvió en agua y se liofilizó para obtener polvo de polisacárido crudo de Pseudostellaria heterophylla. El contenido de polisacárido se determinó mediante el método de fenol-ácido sulfúrico con D-glucosa como estándar51. La composición de monosacáridos se analizó según el método anterior14. El polisacárido se hidrolizó con ácido trifluoroacético (2 M) a 110 °C durante 6 h. El hidrolizado se derivatizó con 1-fenil-3-metil-5-pirazolinona (PMP) a 70 °C durante 1,5 h. Y se utilizó cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) para determinar los monosacáridos de PHP.

Se alojaron veinte ratas SD macho de 6 a 8 semanas de edad y un peso de 200 ± 20 g (SLAC Laboratory Animal Co. Ltd.; Shanghai, China) en una sala con ciclo de luz/oscuridad de 12 h a una temperatura autorregulada (20-25 °C). ) y humedad (50 ± 10%). Todas las ratas tuvieron acceso ilimitado a comida para ratas y agua. El alimento para ratas se adquirió de Beijing HFK Bioscience Co., LTD y su composición se enumera en la Tabla S4. Después de 7 días de aclimatación, las ratas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos de cinco ratas cada uno, denominados grupos Ctrl, Modelo, PHD y PHP. Las ratas se trataron durante 14 días como se ilustra en la Tabla 1. Los protocolos para animales fueron revisados ​​y aprobados por el Comité de Ética en animales de experimentación de la Academia de Ciencias Médicas Chinas de Fujian (No. FJATCM—IAEC2020019). Todos los experimentos y métodos se realizaron de acuerdo con las directrices y regulaciones pertinentes. Y los experimentos con animales se realizaron de conformidad con las directrices ARRIVE (Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments)52.

Se indujo SDS en ratas mediante sonda oral con RRD (1 g/ml) dos veces al día durante los días 1 a 7. Las ratas del grupo PHD recibieron una decocción de TZS (3 g/kg) y las ratas del grupo PHP recibieron una solución cruda de polisacárido de TZS (0,6 g/kg) dos veces al día mediante sonda oral durante los días 8 a 14. La dosis de PHD para ratas (3 g/kg) se calculó a partir de la dosis clínica máxima de TZS (30 g) recomendada en la Farmacopea de la República Popular China. Y la dosis de PHP (0,6 g/kg) fue del 21,71% en TZS según el contenido de polisacárido, que se determinó mediante el método de fenol-ácido sulfúrico con D-glucosa como estándar. Las ratas fueron pesadas diariamente. Se recogieron las heces de cada rata. Se recogieron muestras de sangre de la aorta abdominal 24 h después de la última dosis y el suero se recogió mediante centrifugación. También se recogieron los contenidos cecales de cada rata, se congelaron inmediatamente en nitrógeno líquido y se almacenaron a -80 °C para su posterior análisis.

Las heces recolectadas se secaron para medir el contenido de humedad fecal (FMC) utilizando la siguiente fórmula:

Los colones se lavaron con solución salina y se fijaron inmediatamente en una solución de paraformaldehído al 4% durante 24 h. Las muestras de tejido se deshidrataron en alcohol con concentraciones graduadas y se incluyeron en parafina. y luego se seccionó utilizando un micrótomo para obtener secciones de 5 μm de espesor. Y las secciones se tiñeron con hematoxilina y eosina (HE) y se tomaron imágenes utilizando un microscopio invertido fluorescente (DMIL LED, Leica, Alemania).

Los niveles de AMS se determinaron utilizando un kit de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) (número de código del producto: ml059302, Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd, Shanghai, China). La concentración de GAS y el nivel de citocinas proinflamatorias IL-1β, IL-6 y TNF-α en suero se cuantificaron utilizando kits ELISA respectivamente (números de código de producto: E-EL-R0639C, E-EL-R0012C, E- EL-R0015C, E-EL-R0019C, Elabscience Biotechnology Co., Ltd, Shanghai, China) según las instrucciones del fabricante.

Se añadió 1 ml de agua ultrapura a una muestra de contenido cecal (50 ± 1 mg), mezclándose en vórtex durante 10 s. La mezcla se homogeneizó en un molino de bolas durante 4 min a 40 Hz y se sometió a ultrasonidos en agua con hielo durante 5 min. Este procedimiento fue repetido tres veces. Después de centrifugarlo (4 °C, 5000 rpm, 20 min), el sobrenadante (0,8 ml) se transfirió a una solución mixta que contenía 0,1 ml de H2SO4 al 50 % y 0,8 ml de ácido 2-metilvalérico (25 mg/l de solución madre en terc-metilo). éter butílico) como estándar interno, mezcla en vórtex durante 10 s, oscilación durante 5 min y ultrasonido en agua con hielo durante 10 min. Después de centrifugarlo (4 °C, 10.000 rpm, 15 min) y reposar a -20 °C durante 30 min, se obtuvo el sobrenadante para determinar los ácidos grasos en el contenido cecal mediante análisis GC-MS.

Para realizar GC-MS se utilizaron una columna capilar HP-FFAP y un sistema de cromatógrafo de gases Agilent 7890B acoplado a un espectrómetro de masas Agilent 5977B. Se inyectó una alícuota de 1 μL de cada analito en modo dividido (5:1). Se usó helio como gas portador, el flujo de purga de entrada frontal fue de 3 ml min-1 y el caudal de gas a través de la columna fue de 1 ml min-1. La temperatura inicial se mantuvo a 80 °C durante 1 min; aumentó a 200 °C a una velocidad de 10 °C min-1, mantenido a 200 °C durante 5 min; aumentó a 240 °C a una velocidad de 40 °C min-1, y se mantuvo a 240 °C durante 1 min; Las temperaturas de inyección, línea de transferencia, quad y fuente de iones fueron 240 °C, 240 °C, 230 °C y 150 °C, respectivamente. La energía fue de -70 eV en modo de impacto de electrones. Los datos de espectrometría de masas se adquirieron en modo Scan/SIM con un rango m/z de 33 a 150 después de un retraso del disolvente de 4,0 min.

Las concentraciones de ácidos grasos de cadena corta se calcularon mediante la siguiente fórmula:

donde \({C}_{(con)}\) es el contenido del compuesto objetivo en el contenido cecal (ug g−1), \({C}_{s}\) es la concentración del compuesto objetivo en el sobrenadante para el análisis GC-MS (mg L−1), \({V}_{1}\) es el volumen de la solución de estándar interno (mL), \({V}_{2}\) es el volumen de sobrenadante (mL), \({V}_{3}\) es el volumen de agua ultrapura (mL), \(\mathrm{M}\) es el peso del contenido cecal (mg).

El ADN metagenómico se extrajo de cada muestra cecal utilizando un kit DNeasy Powersoil (Qiagen, Hilden, Alemania) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La región hipervariable V3-V4 del gen 16S rRNA se amplificó a partir del ADN metagenómico con los cebadores: 314F (5′-CCTAYGGGRBGCASCAG-3 ′) y 806R (5′-GGACTACNNGGGTATCTAAT-3′). Los productos de la PCR se purificaron utilizando el kit de extracción en gel Qiagen (Qiagen, Hilden, Alemania). Se generó, evaluó y secuenció una biblioteca de secuenciación en una plataforma Illumina NovaSeq 6000 (lecturas de extremos emparejados de 250 pb). Las lecturas de extremos emparejados se fusionaron utilizando FLASH53 (versión 1.2.7, http://ccb.jhu.edu/software/FLASH/). El filtrado de calidad de las etiquetas sin procesar se realizó en condiciones de filtrado específicas para obtener etiquetas limpias de alta calidad de acuerdo con el proceso de control de calidad QIIME54 (versión 1.9.1, http://qiime.org/index.html). Las etiquetas se compararon con la base de datos de referencia (base de datos Silva, utilizando el algoritmo UCHIME (UCHIME http://www.drive5.com/usearch/manual/uchime_algo.html)55,56 para detectar secuencias de quimera, y luego se eliminaron las secuencias de quimera. y finalmente se obtuvieron las etiquetas efectivas. Las unidades taxonómicas operativas (OTU) se agruparon con una similitud del 97% utilizando el software UPARSE57 (versión 7.0.1001) y se anotaron utilizando el software QIIME. Se calcularon los índices de diversidad alfa, Chao1, Shannon, Simpson y ACE. calculado con QIIME y analizado con el software R (Versión 2.15.3). QIIME calculó la diversidad beta en unifrac ponderado y no ponderado. Se realizó un análisis de coordenadas principales (PCoA) para obtener coordenadas principales y visualizar datos complejos y multidimensionales. Par ponderado Método de grupo con medias aritméticas (UPGMA) La agrupación se realizó como un tipo de método de agrupación jerárquica para interpretar la matriz de distancia utilizando el enlace promedio y se realizó mediante el software QIIME. El análisis del tamaño del efecto LDA (LEfSe) se realizó con el software LEfSe (Versión 1.0) identificar las especies con diferencias significativas entre grupos58.

Los datos experimentales se informaron como media ± desviación estándar (DE). Las diferencias entre grupos se analizaron mediante ANOVA unidireccional y la prueba de Kruskal-Wallis para muestras independientes utilizando el software SPSS (versión 33.0), con valores de p <0,05 considerados estadísticamente significativos. Las diferentes letras minúsculas (a y b) fueron significativamente diferentes en el nivel de p <0,05, que se compararon mediante ANOVA unidireccional seguido de la prueba de LSD de Bonferroni.

Los conjuntos de datos generados durante el estudio actual están disponibles en el repositorio en línea. Los nombres del repositorio y los números de acceso se pueden encontrar a continuación: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/, ON380011-ON380018.

Peng, Y. et al. Microbiota intestinal y síndrome de la medicina china: microbiotas fecales alteradas en pacientes con deficiencia de bazo (Pi). J. tradición. Mentón. Medicina. 40, 137-143. https://doi.org/10.19852/j.cnki.jtcm.2020.01.015 (2020).

Artículo PubMed Google Scholar

Zheng, Y. et al. Integración de la farmacología y el análisis de la microbiota intestinal para explorar el mecanismo del pericarpio de Citri reticulatae contra la deficiencia del bazo inducida por reserpina en ratas. Frente. Farmacéutico. 11, 586350. https://doi.org/10.3389/fphar.2020.586350 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ma, P., Peng, Y., Zhao, L., Liu, F. & Li, X. Efecto diferencial de los componentes polisacáridos y no polisacáridos en la decocción de Sijunzi sobre el síndrome de deficiencia del bazo y sus mecanismos. Fitomedicina 93, 153790. https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153790 (2021).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Wang, N. y col. Aplicación de metabonómica basada en RRLC-QTOF-MS y UPE para investigar el síndrome de deficiencia de Qi de bazo con tratamiento con Panax ginseng. J. Etnofarmacol. 256, 112822. https://doi.org/10.1016/j.jep.2020.112822 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Cao, L. y col. El polisacárido de Codonopsis pilosula mejoró la deficiencia del bazo en ratones al modular la microbiota intestinal y los metabolismos relacionados con la energía. Frente. Farmacéutico. 13, 862763. https://doi.org/10.3389/fphar.2022.862763 (2022).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Tu, J. et al. Tratamiento del síndrome de deficiencia del bazo con atractilósido a de atractylodes lancea procesado con salvado mediante la protección de la barrera mucosa intestinal. Frente. Farmacéutico. 11, 583160. https://doi.org/10.3389/fphar.2020.583160 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Wang, RJ, Peng, Y., Meng, H. & Li, XB Efecto protector de las fracciones de polisacáridos de la decocción de Sijunzi en ratas con deficiencia de bazo inducida por reserpina. RSC Avanzado. 6, 60657–60665. https://doi.org/10.1039/c6ra06361f (2016).

Artículo ADS CAS Google Scholar

Lin, Z. y col. Perfiles metabólicos y microbianos integradores en pacientes con síndrome de deficiencia de bazo-yang. Ciencia. Rep. 8, 6619. https://doi.org/10.1038/s41598-018-24130-7 (2018).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Qiu, JJ y cols. Análisis de la diversidad microbiana intestinal mediante secuenciación de Illumina para la dispepsia funcional con síndrome de depresión hepática-deficiencia del bazo y el intervencionista Xiaoyaosan en un modelo de rata. Mundo J. Gastroenterol. 23, 810–816. https://doi.org/10.3748/wjg.v23.i5.810 (2017).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Rosado, MM et al. El desarrollo del bazo está modulado por la microbiota intestinal neonatal. Inmunol. Letón. 199, 1-15. https://doi.org/10.1016/j.imlet.2018.04.010 (2018).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Shi, K. y col. El rizoma de atractylodis frito protege contra la diarrea inducida por deficiencia del bazo mediante la regulación de la respuesta inflamatoria intestinal y la microbiota intestinal. En t. J. Mol. Ciencia. https://doi.org/10.3390/ijms21010124 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Chen, L. y col. Efecto de la terapia de acupuntura Tiaoshen Jianpi sobre la microbiota intestinal y los ácidos grasos de cadena corta fecales en pacientes con síndrome del intestino irritable tipo diarrea. Mentón. Acupuntura. Moxibustión 41, 137-141. https://doi.org/10.13703/j.0255-2930.20200205-k0002 (2021).

Artículo ADS CAS Google Scholar

Sun, S. y col. La decocción de Qiweibaizhu trata ratas jóvenes con diarrea modulando la microbiota intestinal, los ácidos grasos de cadena corta y la barrera mucosa. Evidente. Complemento basado. Alternativo. Medicina. 2021, 8873294. https://doi.org/10.1155/2021/8873294 (2021).

Artículo de Google Scholar

Hu, J. y col. Efecto hipoglucemiante de polisacáridos con diferente peso molecular de Pseudostellaria heterophylla. Complemento BMC. Alternativo. Medicina. 13, 267. https://doi.org/10.1186/1472-6882-13-267 (2013).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Comité, Farmacopea NP de la República Popular China (Chemical Industry Press, 2020).

Google Académico

Fu, Y., Zhang, H., An, Z. y Liu, H. Efectos del polvo de raíz fibrosa de Pseudostellaria heterophylla y el polisacárido sobre la función inmune de ratas con deficiencia de bazo. J. tradición. Mentón. Veterinario. Medicina. 40, 12-15 (2021).

CAS Google Académico

Gong, Z., Dai, Y., Ma, H., Wang, Z. y Yu, G. El efecto de radix pseudostellariae de 8 hábitats sobre la deficiencia del bazo y la función inmunológica. J. Chin. Medicina. Estera. 24, 281–283 (2001).

CAS Google Académico

Chen, L. y col. Efectos del polisacárido de tallo y hoja de radix pseudostellariae sobre la función inmune intestinal, la morfología de la mucosa intestinal y la flora del contenido del ciego de lechones destetados. Mentón. J.Anim. Nutrición. 29, 1012-1020 (2017).

CAS Google Académico

Hu, DJ, Shakerian, F., Zhao, J. & Li, SP Química, farmacología y análisis de Pseudostellaria heterophylla: una minirevisión. Mentón. Medicina. 14, 21. https://doi.org/10.1186/s13020-019-0243-z (2019).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Choi, YY et al. Efectos inmunomoduladores de Pseudostellaria heterophylla (Miquel) Pax sobre la regulación de los niveles de Th1/Th2 en ratones con dermatitis atópica. Mol. Medicina. Representante 15, 649–656. https://doi.org/10.3892/mmr.2016.6093 (2017).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Fang, ZH, Duan, XC, Zhao, JD, Wu, YJ y Liu, MM El nuevo polisacárido H-1-2 de Pseudostellaria heterophylla alivia la diabetes mellitus tipo 2. Fisiol celular. Bioquímica. 49, 996–1006. https://doi.org/10.1159/000493284 (2018).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Parada Venegas, D. et al. Regulación inmune y epitelial intestinal mediada por ácidos grasos de cadena corta (SCFA) y su relevancia para las enfermedades inflamatorias del intestino. Frente. Inmunol. 10, 277. https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.00277 (2019).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Sun, M., Wu, W., Liu, Z. & Cong, Y. Ácidos grasos de cadena corta de metabolitos de microbiota, GPCR y enfermedades inflamatorias intestinales. J. Gastroenterol. 52, 1–8. https://doi.org/10.1007/s00535-016-1242-9 (2017).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Xiao, A. Efectos de radix Pseudostellariae y el polisacárido sobre la función inmune de ratas con deficiencia de bazo. Modificación. J.Anim. Marido. Veterinario. Medicina. 10, 50–53 (2021).

Google Académico

Fu, Z. y col. Los polisacáridos de Cistanche mejoran la absorción de equinacósidos in vivo y afectan la microbiota intestinal. En t. J. Biol. Macromol. 149, 732–740. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.01.216 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Xue, DH y cols. Comparación de los efectos de Atractylodes lancea crudos y procesados ​​con salvado sobre el síndrome de deficiencia del bazo en ratas. Farmacéutico. revista 14, 214–219. https://doi.org/10.4103/pm.pm_126_17 (2018).

Artículo ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Zhu, J. y col. Un nuevo modelo de diarrea con síndrome de deficiencia de yang bazo-riñón. Evidente. Complemento basado. Alternativo. Medicina. 2018, 4280343. https://doi.org/10.1155/2018/4280343 (2018).

Artículo de Google Scholar

Usted, Y. et al. La fórmula de Shengmai Yin modula la microbiota intestinal de ratas con deficiencia de bazo. Mentón. Medicina. 15, 114. https://doi.org/10.1186/s13020-020-00394-y (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Itoh, H., Katagiri, F., Ikawa, K. y Takeyama, M. Efectos de la domperidona sobre los niveles plasmáticos humanos de motilina, somatostatina, gastrina, hormona adrenocorticotrópica y cortisol. Biol. Farmacéutica. Toro. 28, 1752-1756. https://doi.org/10.1248/bpb.28.1752 (2005).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Xu, J. y col. El atractilósido-A mejora la diarrea por deficiencia del bazo al interferir con la activación de la señalización de TLR4/MyD88/NF-kappaB y regular la homeostasis de la flora intestinal. En t. Inmunofarmacol. 107, 108679. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2022.108679 (2022).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Li, W. y col. Caracterización y bioactividad antitumoral de polisacáridos de astrágalo mediante inmunomodulación. En t. J. Biol. Macromol. 145, 985–997. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2019.09.189 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Liu, H., Yan, Y., Zhang, F. y Wu, Q. Los efectos de mejora inmunológica del polvo liofilizado de Tubiechong (Eupolyphaga sinensis) en ratones inmunodeprimidos inducidos por ciclofosfamida. Inmunol. Invertir. 48, 844–859. https://doi.org/10.1080/08820139.2019.1588291 (2019).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Xie, J. y col. Efectos de Lactobacillus plantarum NCU116 sobre la inmunidad de la mucosa intestinal en ratones inmunodeprimidos. J. Agrícola. Química de los alimentos. 63, 10914–10920. https://doi.org/10.1021/acs.jafc.5b04757 (2015).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Osakowicz, C., Fletcher, L., Caswell, JL y Li, J. Efectos protectores y antiinflamatorios de la protegrina-1 en la infección intestinal por Citrobacter rodentium en ratones. En t. J. Mol. Ciencia. 22, 9494. https://doi.org/10.3390/ijms22179494 (2021).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Kan, Y. et al. Los efectos reguladores del polisacárido de Pseudostellaria heterophylla sobre la función inmune y la flora intestinal en ratones inmunodeprimidos. Ciencia de los alimentos. Nutrición. 10, 3828–3841. https://doi.org/10.1002/fsn3.2979 (2022).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Feng, H., Zhu, X. y Wang, C. Progreso de la investigación sobre el mecanismo de fortalecimiento de los medicamentos del bazo para la microecología intestinal. Mentón. J.Inf. MTC 25, 137-140. https://doi.org/10.3969/j.issn.1005-5304.2018.10.033 (2018).

Artículo de Google Scholar

Yang, XQ y cols. Extracción, caracterización estructural y efecto inmunorregulador de una fracción de polisacárido de Radix Aconiti Lateralis Preparata (Fuzi). En t. J. Biol. Macromol. 143, 314–324. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2019.11.208 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Grigor'eva, IN Enfermedad de cálculos biliares, obesidad y relación firmicutes/bacteroidetes como posible biomarcador de disbiosis intestinal. JPers. Medicina. 11, 13. https://doi.org/10.3390/jpm11010013 (2020).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Van den Bossche, L. et al. El ácido ursodesoxicólico y sus especies conjugadas con taurina o glicina reducen la disbiosis colitogénica e igualmente suprimen la colitis experimental en ratones. Aplica. Reinar. Microbiol. https://doi.org/10.1128/AEM.02766-16 (2017).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Amaretti, A. et al. Perfilado de degradadores de proteínas en cultivos de microbiota intestinal humana. Frente. Microbiol. 10, 2614. https://doi.org/10.3389/fmicb.2019.02614 (2019).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Sun, J. y col. Propiedades antiinflamatorias y modulación de la microbiota intestinal de un polisacárido soluble en álcali de la batata morada en ratones con colitis inducida por DSS. En t. J. Biol. Macromol. 153, 708–722. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2020.03.053 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Wang, J. y col. El efecto de la composición microbiana y proteómica en la mejora del estreñimiento funcional por el polisacárido de Chrysanthemum morifolium. Química de los alimentos. Toxico. 153, 112305. https://doi.org/10.1016/j.fct.2021.112305 (2021).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Wu, J. y col. Rhein modula el metabolismo de las purinas del huésped en el intestino a través de la microbiota intestinal y mejora la colitis experimental. Teranóstica 10, 10665–10679. https://doi.org/10.7150/thno.43528 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Li, FT y cols. Efectos in vitro del ginseng y la semilla de Zizyphus jujuba var. spinosa en la microbiota intestinal de ratas con deficiencia de bazo. Química. Biodiversores. 17, e2000199. https://doi.org/10.1002/cbdv.202000199 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Ahern, PP y Maloy, KJ Comprensión de las interacciones entre la inmunidad y la microbiota en el intestino. Inmunología 159, 4-14. https://doi.org/10.1111/imm.13150 (2020).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Donia, MS & Fischbach, MA Pequeñas moléculas de la microbiota humana. Ciencia https://doi.org/10.1126/science.1254766 (2015).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Schirmer, M. y col. Vincular el microbioma intestinal humano con la capacidad de producción de citocinas inflamatorias. Celda 167, 1125-1136. https://doi.org/10.1016/j.cell.2016.10.020 (2016).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ma, SP, Xue, DH, Zhang, BX, Jiang, YJ & Cai, Q. Análisis metabolómico dirigido de siete ácidos grasos de cadena corta en heces de ratas con síndrome de deficiencia del bazo después de administrar rizoma de atractylodis crudo y frito con salvado mediante gas cromatografía-espectrómetro de masas. Farmacéutico. revista 17, 93-100. https://doi.org/10.4103/pm.pm_185_20 (2021).

Artículo CAS Google Scholar

Li, H. y col. La mezcla probiótica de cepas de Lactobacillus plantarum mejora el metabolismo de los lípidos y la estructura de la microbiota intestinal en ratones alimentados con una dieta rica en grasas. Frente. Microbiol. 11, 512. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.00512 (2020).

Artículo PubMed PubMed Central Google Scholar

Yang, F., Li, J., Pang, G., Ren, F. y Fang, B. Efectos del dietilfosfato, un metabolito no específico de los pesticidas organofosforados, sobre los lípidos séricos, las hormonas, la inflamación y la microbiota intestinal. Moléculas 24, 2003. https://doi.org/10.3390/molecules24102003 (2019).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

DuBois, M., Gilles, KA, Hamilton, JK, Rebers, PA y Smith, F. Método colorimétrico para la determinación de azúcares y sustancias relacionadas. Anal. Química. 28, 350–356. https://doi.org/10.1021/ac60111a017 (1956).

Artículo CAS Google Scholar

Percie du Sert, N. et al. Las directrices ARRIVE 2.0: Directrices actualizadas para informar sobre investigaciones con animales. PLoS Biol. 18, e3000410. https://doi.org/10.1371/journal.pbio.3000410 (2020).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Magoc, T. & Salzberg, SL FLASH: Ajuste rápido de la longitud de lecturas cortas para mejorar los ensamblajes del genoma. Bioinformática 27, 2957–2963. https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btr507 (2011).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Caporaso, JG et al. QIIME permite el análisis de datos de secuenciación comunitaria de alto rendimiento. Nat. Métodos 7, 335–336. https://doi.org/10.1038/nmeth.f.303 (2010).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Haas, BJ y cols. Formación y detección de secuencias de ARNr 16S quimérico en amplicones de PCR Sanger y 454-pirosecuenciados. Genoma Res. 21, 494–504. https://doi.org/10.1101/gr.112730.110 (2011).

Artículo CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Quast, C. y col. El proyecto de base de datos de genes de ARN ribosómico SILVA: procesamiento de datos mejorado y herramientas basadas en web. Ácidos nucleicos res. 41, D590-596. https://doi.org/10.1093/nar/gks1219 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Edgar, RC UPARSE: Secuencias OTU de alta precisión a partir de lecturas de amplicones microbianos. Nat. Métodos 10, 996–998. https://doi.org/10.1038/nmeth.2604 (2013).

Artículo CAS PubMed Google Scholar

Segata, N. y col. Descubrimiento y explicación de biomarcadores metagenómicos. Genoma Biol. 12, 60. https://doi.org/10.1186/gb-2011-12-6-r60 (2011).

Artículo de Google Scholar

Descargar referencias

Esta investigación fue apoyada por la Fundación de Ciencias Naturales de la Provincia China de Fujian (No. 2019J01334), el Proyecto de Investigación Fundamental para Institutos de Investigación Científica sin fines de lucro en la Provincia de Fujian (No. 2019R1003-4), el Comité Central para Orientar la Ciencia Local y Desarrollo Tecnológico (Nº 2020L3012), y el Proyecto 2019YFC1710504, apoyado en los Planes Nacionales Claves de I+D.

Estos autores contribuyeron igualmente a este trabajo: Qing Xiao y Li Zhao.

Instituto de Materia Médica, Academia de Ciencias Médicas Chinas de Fujian, Fuzhou, Fujian, República Popular China

Qing Xiao, Li Zhao, Chang Jiang, Yanjin Zhu, Jizhou Zhang y Juan Hu

Departamento de Farmacia, Segundo Hospital Afiliado de la Universidad de Medicina Tradicional China de Fujian, Fuzhou, Fujian, República Popular China

juan hu

Facultad de Farmacia, Universidad de Medicina Tradicional China de Fujian, Fuzhou, Fujian, República Popular China

juan hu

Facultad de Ingeniería y Ciencias Biológicas, Universidad de Fuzhou, Fuzhou, Fujian, República Popular China

Guozeng Wang

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

También puedes buscar este autor en PubMed Google Scholar.

QX concibió el estudio, lo diseñó, realizó el análisis de datos y escribió el manuscrito; LZ realizó los experimentos; CJ ayudó a preparar cifras y realizó análisis de datos; YZ realizó los experimentos; JZ realizó los experimentos y ayudó a preparar figuras; JH diseñó el estudio, coordinó el estudio; GW concibió el estudio, lo diseñó y realizó el análisis de datos. Todos los autores revisaron el manuscrito. QX y LZ contribuyeron igualmente al trabajo.

Correspondencia a Juan Hu o Guozeng Wang.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

Springer Nature se mantiene neutral con respecto a reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.

Acceso Abierto Este artículo está bajo una Licencia Internacional Creative Commons Attribution 4.0, que permite el uso, compartir, adaptación, distribución y reproducción en cualquier medio o formato, siempre y cuando se dé el crédito apropiado a los autores originales y a la fuente. proporcione un enlace a la licencia Creative Commons e indique si se realizaron cambios. Las imágenes u otro material de terceros en este artículo están incluidos en la licencia Creative Commons del artículo, a menos que se indique lo contrario en una línea de crédito al material. Si el material no está incluido en la licencia Creative Commons del artículo y su uso previsto no está permitido por la normativa legal o excede el uso permitido, deberá obtener permiso directamente del titular de los derechos de autor. Para ver una copia de esta licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Reimpresiones y permisos

Xiao, Q., Zhao, L., Jiang, C. et al. Los polisacáridos de Pseudostellaria heterophylla modulan la microbiota intestinal y alivian el síndrome de deficiencia del bazo en ratas. Informe científico 12, 20217 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-24329-9

Descargar cita

Recibido: 15 de agosto de 2022

Aceptado: 14 de noviembre de 2022

Publicado: 23 de noviembre de 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-24329-9

Cualquier persona con la que compartas el siguiente enlace podrá leer este contenido:

Lo sentimos, actualmente no hay un enlace para compartir disponible para este artículo.

Proporcionado por la iniciativa de intercambio de contenidos Springer Nature SharedIt

Al enviar un comentario, acepta cumplir con nuestros Términos y pautas de la comunidad. Si encuentra algo abusivo o que no cumple con nuestros términos o pautas, márquelo como inapropiado.